점액

Scientific Reports 12권, 기사 번호: 21768(2022) 이 기사 인용

1926년 접속

14 알트메트릭

측정항목 세부정보

민달팽이 Arion vulgaris는 유럽에서 최악의 침입성 초식 해충 중 하나로 큰 주목을 받았으며 운동을 위해 분비하는 딱딱한 점액으로 유명합니다. 이 연구에서 우리는 Arion 분비물로부터 세포외 소포, 특히 엑소솜과 엑소솜 유사 소포의 분리와 특성화에 중점을 두었습니다. 우리는 초원심분리에 의한 슬러그 점액 수집 및 후속 소포 분리 방법을 개발했습니다. 평균 직경이 ~ 100nm인 분리된 소포는 풍부한 단백질과 짧은 RNA뿐만 아니라 포유류 갈렉틴과 유사한 접착 분자를 운반합니다. 우리는 슬러그 세포외 소포가 시험관 내 분석에서 식물 세포와 인간 암세포에 의해 내부화되고 생리활성 화합물에 의해 로드될 수 있다는 것을 입증했으며, 이는 생명공학 활용을 위한 흥미로운 도구가 됩니다.

스페인 민달팽이(Arion vulgaris, Moquin-Tandon, 1855)는 유럽에서 최악의 침입성 해충으로 분류된 가장 흔한 유럽 복족류 종입니다. 아리온 민달팽이는 상당한 생태적 피해1,2,3,4,5 및 경제적 피해6,7를 유발하는 것으로 알려진 탐욕스러운 초식 동물입니다. 또한 병원성 박테리아의 매개체이자 기생충의 숙주 역할을 하여 애완동물과 가축에 해를 끼칩니다8,9,10. Arion vulgaris는 점성이 높고 끈적거리며 제거하기 어려운 복부 점액을 생성하며 주로 5개의 상피하 측면 및 복부 위치 샘 유형에 의해 생성됩니다. 이를 통해 지리적 분산의 성공에 기여할 수 있는 다양한 유형의 표면과 자연적 및 인공적 장애물을 극복할 수 있습니다. 유럽 ​​전역의 현재 감염 수준11,12,13.

이 연구에서 우리는 아리온 점액에서 세포외 소포, 특히 엑소좀과 엑소솜 유사 소포(EX)를 검색하기로 결정했습니다. EX는 대부분의 진핵세포의 엔도솜 구획에서 생성되는 평균 직경이 ~ 100nm인 세포외 소포로, 생물의학 응용 분야에서 큰 잠재력을 가지고 있습니다(14,15에서 철저히 검토됨). 예를 들어, Streptomyces sp.에서 분리된 독소루비신(DOX, Adriamycin)이 있습니다. 다양한 고형 악성종양에 대한 1차 치료법으로 자주 사용되는 이 약(1974년 FDA 승인)은 용량 의존적 심장 및 중증 전신 독성으로 알려져 있으며, 이는 인간 체외 세포에서 추출한 엑소좀과의 접합으로 크게 감소될 수 있습니다. 문화16.

연구 및 최근 치료법을 위한 전통적인 EX 소스인 포유류 다음으로, 비포유류 EX 소스는 최근 흥미로운 특성과 복잡한 역할(종 간 상호 작용에서 왕국 간 의사 소통에 이르기까지)로 인해 인기를 얻고 있습니다17,18, 19,20,21,22. 꿀벌 제품, 뱀 독 또는 식물 및 과일과 같은 다양한 출처의 EX는 농업, 제약 및 생물 의학 산업을 위한 점점 더 매력적인 도구 상자가 되고 있습니다17,20,23,24. 이 연구 분야의 발전(및 잠재적인 대규모 EX 격리를 위한 Arion 민달팽이의 가용성)에 영감을 받아 우리는 생명공학 응용을 위한 EX의 잠재적 대체 소스로서 유해한 Arion vulgaris를 검사하기 시작했습니다.

이 연구에서 우리는 초원심분리에 의한 슬러그 점액 수집 및 후속 EX 분리를 위한 간단하고 효율적인 방법을 제공했습니다. 슬러그 EX는 동적 광 산란 기술에 의해 제공되는 크기 분포 프로파일과 함께 나노 입자 크기 분석 및 투과 전자 현미경으로 특성화되고 시각화되었습니다. EXs 단백질 함량은 비신코닌산 및 CBQCA 단백질 정량 분석으로 정량화하고, RNA 분리를 수행하고, 웨스턴 블랏을 사용하여 접착 분자의 존재를 확인했습니다. 또한, 시험관 내 조건에서 세포 흡수와 함께 슬러그 EX의 모델 약물 로딩 효능이 입증되었습니다.